Title: Long - Term Culture and Improved Transfection Effciency of Gonadal Primordial Germ Cells (gPGCs) for the Production of Transgenic Chicken
Abstract: 6일령 배자로부터 분리한 원시생식세포 (PGC)를 IGF-1, LIF, IL-11, SCF, 그리고 bFGF등을 첨가하여 계대하지 않은 상태에서 약 3개월간 배양 하였다. 배양 약 7일경부터 PGC가 콜로니를 형성하기 시작하였는데 약 10여개의 세포들이 서로 군집형태를 이루었다. 원시생식세포의 형태학적 또는 조직학적특징들이 약 3개월 배양후에도 7일배양한 세포의 특징과 다를바 없었다. 장기배양한 원시생식세포는 mouse의 ES cell 항원인 SSEA-1, 그리고 닭의 PGC항원인 2C9에 양성적으로 반응하였으며, 배양중 약 50%의 세포들이 분열 능력이 있음을 관찰하였다. 장기 배양중 형태학적, 조직학적 특징이 murine embryonic stem cell과 유사함을 알 수 있었다. 전기영동법에 의한 유전자전이법을 liposome방법과 비교하였을 때, 전기영동법의 효율 (80%)이 liposome (17%)에 비해 월등히 높았다. 유전자 전 이후 Ficoll을 이용하여 분리한 gPGC 약 200여개를 2.5일령 (stage 17)의 배자혈관에 주입하여 추가로 3.5일(stage 29), 7.5일(stage 36) 그리고 부화시킨 후 외래 유전자 (pCMVβ) 도입 유무를 PCR 기법을 이용하여 확인 한 결과 6일령, 10일령, 그리고 부화한 병아리에서 각각 100%, 67%, 41%의 효율로 외래 유전자가 도입되었을 알 수 있었다. 특히 부화한 병아리의 경우 외래 유전자가 생식기에서만 발견됨을 알 수 있었다. 따라서 이러한 결과는 주입한 원시생식세포가 수용체의 원시생식기에 도달한 후 생식기 형성에 기여하였으며, 형질전환 닭 생산을 위한 유용한 벡터로서 사용될 수 있는 가능성을 제시하였다.
Publication Year: 1998
Publication Date: 1998-11-01
Language: ko
Type: article
Access and Citation
Cited By Count: 1
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