Title: Control of germinal vesicle breakdown in bovine x murine hybrid oocytes
Abstract: ― Bovine oocytes cultured in control medium or in medium containing dibutyrylcyclic adenosine monophosphate (dbcAMP) or an inhibitor of cyclic nucleotide phosphodiesterase (3isobutyl-1-methylxanthine, IBMX) undergo germinal vesicle breakdown (GVBD).On the other hand, mouse oocytes remain arrested at the germinal vesicle (GV) stage when dbcAMP or IBMX is present.When 1 bovine GV stage oocyte is fused to 1 GV stage mouse oocyte, dissolution of both species' GV occurred in dbcAMP-supplemented medium.Only when 4 to 5 GV stage mouse oo- cytes are fused to 1 GV stage bovine oocyte, and these giant cells are cultured in dbcAMP-medium, is maturation arrested with only GVs present in the cytoplasm.The inhibitory effect is more evident in IBMX-supplemented medium.Here nearly 50% of the fused cells exhibit GVs, both mouse and bovine, when 1 cattle GV oocyte is fused to 1 mouse GV oocyte and the fused cells are cultured for 24 h.Moreover, nearly all GVs are well preserved after fusion of 1 bovine oocyte to 2 or more mouse oocytes.When these hybrid cells after 24 h culture in IBMX are then washed and cultured in control medium for a further 24 h, GVBD occurred in all cells.We are of the opinion that this novel approach (ie mixing of sensitive and non-sensitive cytoplasm) may in the future better explain the mechanisms involved in the regulation of mammalian oocyte maturation.meiosis / mammals / oocyte / cell fusion Résumé ― Contrôle de la rupture de la vésicule germinative dans des ovocytes hybrides (vache x souris).Des ovocytes de vache cultivés dans un milieu témoin ou dans un milieu conte- nant du dibutyryl adénosine monophosphate cyclique (dbcAMP) ou un inhibiteur de la phosphodiestérase (3-isobutyl-1-méthylxanthine, IBMX) subissent la rupture de la vésicule germinative.Au contraire, des ovocytes de souris restent au stade de la vésicule germinative (VG) en présence de dbcAMP ou d'IBMX.Après fusion d'un ovocyte de vache et d'un ovocyte de souris, la rupture des VG se produit dans le milieu supplémenté en dbcAMP.C'est seulement quand 4 ou 5 ovocytes de souris sont fusionnés avec un ovocyte de vache que la maturation est bloquée au stade de la VG en présence de dbcAMP.L'effet inhibiteur de l'IBMX est supérieur : presque 50% des cellules restent au stade de la VG, après fusion d'un ovocyte de vache avec un ovocyte de souris et plus de 90% après fusion d'un ovocyte de vache avec 2 ovocytes de souris.Quand ces ovocytes hybrides culti- vés 24 h avec IBMX sont lavés et cultivés dans le milieu témoin pendant 24 h, la rupture de la VG se produit dans tous les ovocytes.Cette nouvelle approche (mélange de cytoplasme sensible ou non) devrait être un outil pour étudier les mécanismes de la régulation de la maturation des ovocytes de Mammifères.méiose / Mammifères / ovocytes / fusion